D'r binne in protte ûnbesjoene helden om ús hinne, dy't gewoanlik lykje te wêzen, mar feitlik drage se stilwei in protte oan ús by.Proteinase K is de "ûnbesonge held" yn 'e molekulêre diagnostyksektor, hoewol yn fergeliking mei de "grutte en machtige" yn 'e yndustry, proteinase K is sa leech-kaai dat wy it belang lang hawwe oersjoen.Mei it útbrekken fan 'e nije kroanepidemy is de fraach nei proteinase K ferhege, en it oanbod yn binnen- en bûtenlân is fier efter de konsumpsje, en elkenien realisearre ynienen dat proteinase K sa wichtich is.
Wat is it gebrûk fan proteinase K?
Proteinase K is in serineprotease mei proteolytyske enzymaktiviteit en kin aktiviteit behâlde yn in breed oanbod fan omjouwings (pH (4-12.5), hege sâltbuffer, hege temperatuer fan 70 °C, ensfh.Dêrnjonken wurdt de aktiviteit fan proteinase K net ynhibeare troch SDS, urea, EDTA, guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, ensfh., En in bepaalde hoemannichte detergent kin ek de aktiviteit fan proteinase K ferbetterje. ), iten (meat tenderization), lear (hier verzachten), winemaking (alkohol clarification), amino acid tarieding (degradearre fearren), nucleic acid ekstraksje, in situ hybridization, ensfh, proteinase K Der binne applikaasjes.De meast brûkte tapassing is ekstraksje fan nukleïnezuur.
Proteinase K kin alle soarten aaiwiten yn 'e stekproef enzymolysearje, ynklusyf dy histonen dy't strak bûn binne oan nukleïnesoeren, sadat de nukleïnesoeren út 'e stekproef kinne wurde frijlitten en yn 'e ekstrakt frijlitten, wat de folgjende stap fan ekstraksje en suvering fasilitearret.By it opspoaren fan virale nukleïnesûr is proteinase K ien fan 'e wichtige komponinten yn' e oplossing foar sampling fan firus.Proteinase K kin it mantelproteïne fan it firus kreakje en ynaktivearje, dat feiliger is tidens it transport- en deteksjestadium;boppedat, proteinase K kin ek degradearje RNase foarkomt de degradaasje fan virale RNA en fasilitearret nucleic acid detection.
De oernachtich bekendheid fan proteinase K
Oft op it mêd fan wittenskiplik ûndersyk of op it mêd fan IVD, nukleïnesûrwinning is it meast basale eksperimint, dus proteinase K hat altyd in tige wichtich bestean west.Yn it ferline wie proteinase K lykwols folle minder bekend as syn rol.In grut part fan dit wie om't de oanbod en fraach relaasje fan proteinase K wie tige stabyl.Net folle minsken soene tinke dat it oanbod fan proteinase K in probleem wêze soe.
Mei it útbrekken fan 'e nije kroanepidemy is de fraach nei testen fan nukleïnesûr tanommen.Oant ein juny 2020 hat Sina hast 90 miljoen nije kroantests foltôge, en dit oantal is noch mear alarmearjend op wrâldwide skaal.Yn eksperiminten foar ekstraksje fan nukleïnezuur is de wurkkonsintraasje fan proteinase K sawat 50-200 μg / ml.Yn 't algemien nimt it sawat 100 μg proteinase K om in stekproef fan nukleïnesûr te ekstrahearjen.Yn eigentlik gebrûk, om de effisjinsje fan ekstraksje fan nukleïnesûr te fergrutsjen, sil Proteinase K faak brûkt wurde yn in ferhege hoemannichte.Deteksje fan nukleïnesûr fan it nije coronavirus hat in grutte fraach brocht oan proteinase K.De oarspronklike oanbod en fraach lykwicht fan proteinase K waard gau brutsen, en proteinase K waard oernachtich in wichtich epidemy previnsje materiaal.
Swierrichheden by de produksje fan proteinase K
Hoewol mei de ûntwikkeling fan 'e epidemy de wichtige wearde fan proteinase K troch minsken wurdearre is, is it beskamsum dat troch de oermjittige lege-kaai fan proteinase K in pear ynlânske bedriuwen belutsen west hawwe by de produksje fan proteinase K. As minsken proteinase K-produksje wolle fêstigje By it produksjeproses waard ûntdutsen dat proteinase K in ekstreem spesjaal aaiwyt is.It is ekstreem útdaagjend om de produksjekapasiteit fan proteinase K yn in koarte perioade út te wreidzjen.
De grutskalige produksje fan proteinase K hat de folgjende swierrichheden
1. Low ekspresje
Proteinase K kin de measte aaiwiten net-spesifyk degradearje en serieuze toxiciteit feroarsaakje foar de ekspresjehostsel.Dêrom is it ekspresjenivo fan proteinase K oer it algemien heul leech.Screening fan ekspresjesystemen en stammen dy't proteinase K tige útdrukke, fereasket oer it algemien in langere syklus.
2. Residuen fan pigminten en nucleic soeren
Grutskalige fermentaasje yntroduseart in grutte hoemannichte pigment- en host-nukleïnezuurresiduen.It is lestich om dizze ûnreinheden te ferwiderjen mei in ienfâldige suveringsproses, en komplekse suvering fergruttet de kosten en ferleget de hersteltiid.
3. Ynstabiliteit
Proteinase K is net stabyl genôch, it kin himsels enzymolysearje, en it is lestich om it stabile by 37 ° C foar in lange tiid te bewarjen sûnder in beskermjende agint.
4. Maklik te precipitate
By it tarieden fan it gevriesdroogde poeder fan proteinase K, om te soargjen dat de fêste ynhâld fan proteinase K yn it gevriesdroogde poeder grut is, is it nedich om in gevriesdroogde beskermjende agint ta te foegjen yn in hege konsintraasje, mar as de konsintraasje fan proteinase K berikt 20mg / ml en boppe, it is maklik.
5. Grutte ynvestearring
Proteinase K hat sterke protease-aktiviteit en kin oare proteasen yn it laboratoarium hydrolysearje.Dêrom fereasket proteinase K spesjalisearre produksjegebieten, apparatuer en personiel foar ûndersyk en ûntwikkeling en produksje.
XD BIOCHEM's proteinase K-oplossing
XD BIOCHEM hat in folwoeksen proteïne-ekspresje- en suveringsplatfoarm, en hat rike ûnderfining yn 'e ekspresje en suvering fan rekombinante aaiwiten en optimisaasje fan produksjeprosessen.Troch de rappe formaasje fan in ûndersyks- en ûntwikkelingsteam is it grutskalige produksjeproses fan proteinase K oerwûn.De moanlikse útfier fan gevriesdroogde poeder is mear as 30 KG.It produkt hat stabile prestaasjes, hege enzyme spesifike aktiviteit, en gjin gasthear cytochrome en nucleic acid residuen.Wolkom om kontakt te meitsjen mei XD BIOCHEM Krij in proefpakket (e-post:sales@xdbiochem.comTel: +86 513 81163739).
De technyske oplossingen fan XD BIOCHEM omfetsje
Mei it brûken fan multi-kopie plasmide-yntegraasje wurde stammen mei hege ekspresje mei in ekspresjenivo fan 8g / L selektearre, wat it probleem fan leech ekspresjenivo fan proteinase K oerwint.
Troch de oprjochting fan in multi-stap suvering proses, de host cytochrome en nucleic acid residuen fan proteinase K waarden mei súkses fuortsmiten ûnder de standert wearde.
Troch hege-throughput-screening fan beskermjende bufferformuleringen waard in buffer selektearre dy't proteinase K op 37 ° C stabyl opslaan kin.
Screeningbuffers oerwint it probleem dat proteinase K maklik is te aggregearjen en te precipitearjen by hege konsintraasjes, en legt de basis foar it friesdroogjen fan proteinase K mei hege fêste ynhâld.
XD BIOCHEM proteinase K sample
XD BIOCHEM proteinase K stabiliteitstest: d'r sil gjin signifikante feroaring wêze yn aktiviteit nei 80 d by keamertemperatuer
XD BIOCHEM proteinase K stabiliteitstest: d'r sil gjin signifikante feroaring wêze yn aktiviteit nei 80 d by keamertemperatuer.
Fergeliking fan it nukleïnesoere-ekstraksje-effekt fan XD BIOCHEM proteinase K en konkurrearjende produkten.Yn it proses fan ekstraksje fan nukleïnesoeren wurde XD BIOCHEM en kompetitive proteinase K respektivelik brûkt.De ekstraksje-effisjinsje fan XD BIOCHEM proteinase K is heger en de Ct-wearde fan it doelgen is leger.
Post tiid: Dec-31-2021