4-Nitrofenyl beta-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

Effekt: ONPG is in substraat dat spesifyk brûkt wurdt om de oanwêzigens en aktiviteit fan it enzym β-galactosidase te detektearjen.As β-galactosidase-enzyme oanwêzich en aktyf is, splitst it ONPG yn twa produkten: o-nitrophenol en in galactose-derivaat.De befrijing fan o-nitrophenol resultearret yn in giele kleurferoaring, dy't mjitten wurde kin mei in spektrofotometer.

Applikaasje: ONPG hat ferskate tapassingen yn molekulêre biology en biogemy-ûndersyk:

Bepaling fan β-galactosidase-aktiviteit: ONPG wurdt faak brûkt om de aktiviteit fan β-galactosidase-enzym te mjitten en te kwantifisearjen.De taryf fan o-nitrophenolfoarming, dy't direkt evenredich is mei de enzymaktiviteit, kin spektrofotometrysk mjitten wurde.

Gene ekspresje en regeling: ONPG wurdt faak brûkt yn eksperiminten yn ferbân mei gene ekspresje en regeling stúdzjes.It wurdt faak brûkt yn fúzjeproteinassays, lykas it gewoan brûkte lacZ-fúzjesysteem, om de ekspresje fan genen te studearjen ûnder de kontrôle fan spesifike promotors.De beta-galactosidase-aktiviteit mjitten mei ONPG jout ynsjoch yn it nivo fan gene-ekspresje.

Screening foar β-galactosidase-aktiviteit: ONPG kin brûkt wurde as in kolorimetryske screeningmetoade yn rekombinante DNA-technology om de oanwêzigens en funksjonaliteit fan it LacZ-gen te identifisearjen, dat kodearret β-galactosidase.Dizze screeningmetoade helpt by it identifisearjen fan klonen dy't it gen fan belang befetsje.

Enzymkinetikastúdzjes: ONPG is ek nuttich by it bestudearjen fan 'e kinetika fan β-galactosidase enzyme.Troch it mjitten fan it taryf fan enzyme-substratreaksje by ferskate substraatkonsintraasjes, is it mooglik om kinetyske parameters te bepalen lykas Michaelis-Menten-konstanten (Km) en maksimale reaksjesnelheden (Vmax).