Hoe te bepalen de optimale konsintraasje?
Foar de inducer IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside), hoe heger de konsintraasje, hoe better.De optimale konsintraasje hinget ôf fan 'e spesifike eksperimintele betingsten en it winske induksje-effekt.
Yn 't algemien wurdt de konsintraasje fan IPTG brûkt yn it berik fan 0,1-1 mM.Legere konsintraasjes kinne negative effekten op selgroei ferminderje en kinne cytotoxisiteit ferminderje fanwegen oerekspresje fan doelproteinen.Hegere konsintraasjes kinne oermjittige selmetabolike lêst feroarsaakje, dy't selgroei en ekspresje-effisjinsje beynfloedzje.
De manier om de optimale konsintraasje te bepalen kin wêze om it ekspresjenivo fan it doelprotein te evaluearjen troch IPTG-ynduksjetests út te fieren by ferskate konsintraasjes.Lytsskalige kultuertests kinne wurde útfierd mei in berik fan IPTG-konsintraasjes (bgl. 0,1 mM, 0,5 mM, 1 mM, ensfh.) Blot of fluorescence-deteksje).Neffens de eksperimintele resultaten waard de konsintraasje mei it bêste ekspresje-effekt selektearre as de optimale konsintraasje.
Derneist kinne jo ek ferwize nei de relevante literatuer as de ûnderfining fan oare laboratoaria om it algemien brûkte IPTG-konsintraasjeberik te begripen ûnder ferlykbere eksperimintele omstannichheden, en dan optimalisearje en oanpasse neffens de eksperimintele behoeften.
It is wichtich om te notearjen dat de optimale konsintraasje kin ferskille ôfhinklik fan ferskate ekspresjesystemen, doelproteinen en eksperimintele betingsten, dus it is it bêste om te optimalisearjen op in saak-by-saak basis.
Post tiid: Sep-28-2023